Анализ микобактерии туберкулеза и его расшифровка

Туберкулез – одно из опасных и распространенных инфекционных заболеваний в наше время. Источником туберкулеза является микобактерия (Mycobactеrium tuberculоsis) – так называемая палочка Коха. Именно на ее обнаружении и основаны многие виды диагностики. Как обнаруживают МБТ при туберкулезе, как предупредить заражение, и что это за бактерия, и следует знать каждому человеку.

Виды лабораторной диагностики

В современной медицине существует несколько способов лабораторной диагностики туберкулеза. Наиболее распространенными и эффективными считаются:

• окрас тканей биологических жидкостей по Цилю-Нильсону с микроскопическим исследованием материала;
• серологические способы;
• метод полимеразной цепной реакции (ПЦР);
• бактериологический посев.

Также для скрининговой диагностики туберкулеза у детей и в некоторых случаях у взрослых применяют туберкулиновую пробу Манту.

1. Окрас тканей по Цилю-Нильсону используют для выявления МБТ в мокроте пациента. Для достоверности анализа необходимо правильно собрать мокроту в специальный контейнер. Затем, собранный материал наносят на лабораторное стекло и обрабатывают раствором – фуксином Нильсона. После чего, его остатки смывают, а гистологический материал обрабатывают серной кислотой для обесцвечивания.

   В завершении мазок окрашивают раствором Метиленовым синим. К нему являются нечувствительными только кислотоустойчивые микроорганизмы. Этот метод не применим на ранних стадиях заболевания, так как из-за небольшого количества микобактерий в мокроте результат будет ложноотрицательным. Также указанный способ неприменим при закрытой и внелегочной формах туберкулеза.

2. Серологический способ основан на выявлении в крови специфических антител к микобактерии. Это происходит благодаря иммунному ответу организма на чужеродные ткани. При попадании палочки Коха в организм, иммунная система сразу же пытается уничтожить чужеродный объект. Начинают вырабатываться иммуноглобулины, которые атакуют бактерию.

   В зависимости от времени инфицирования, в крови обнаруживаются разные иммуноглобулины. В течение 2-3 недель после начала заболевания, в крови выявляются IgM. Они свидетельствуют о недавнем инфицировании. Затем появляются IgA и IgG, которые говорят об активном течении болезни и о ее длительном течении на протяжении многих месяцев.

   

   Иммуноглоубулин класса G

   Этот метод исследования является высокочувствительным и способен выявить МБТ даже при закрытой форме туберкулеза. Такой вариант диагностики позволяет не только обнаружить заболевание, но и определить стадию его развития, не дожидаясь ярко выраженных клинических симптомов.

3. Полимеразная цепная реакция – достаточно точный способ исследования на обнаружение туберкулезной инфекции. Его использование позволяет выявить инфекцию на начальных стадиях. Благодаря ПЦР, как результату развития молекулярной генетики, удается выявить в крови и других биологических жидкостях пациента частицы ДНК или РНК бактерии.

   Такой способ диагностики выявляет штаммы, устойчивые к антибиотикам.

   Часто диагностика внелегочного туберкулеза затруднена из-за схожести симптоматики с другими заболеваниями. Неоднократно путают туберкулезы почек, мочевого пузыря, простаты с пиелонефритом, простатитом, циститом и другими заболеваниями.

   С помощью ПЦР проводят анализ мочи на микобактерии туберкулеза, для выявления поражений данным недугом мочеполовой системы. Быстрая процедура сдачи и простая технология исследования опровергает или подтверждает туберкулез соответствующих органов с точностью до 90%.

4. Бактериоскопический метод относится к высокочувствительным исследованиям. Он подразумевает посев исследуемого материала на различные питательные среды. При наличии туберкулезной палочки через какое-то время на этих средах вырастут колонии бактерий. Именно с помощью данного метода происходит выбор антибиотика.

   Материал высеивают на среды с антибиотиком и наблюдают, на каком из них рост бактерии прекратится. Минусом данного способа является то, что при исследовании мокроты невозможно выявить внелегочной туберкулез либо его закрытую форму.

   

   Рост микобактерий на питательных средах

5. Туберкулиновая проба Манту направлена на выявление иммунного ответа на введенный в организм туберкулезный антиген.

Подготовка к исследованию

Большое значение для получения достоверного результата анализа на выявление МБТ имеет правильная подготовка перед проведением исследования.

Наиболее часто исследуется мокрота пациента. В основном сдавать мокроту необходимо 3 раза:

• желательно первое исследование провести до начала приема антибиотиков;
• первая сдача происходит в медицинском учреждении через 1-2 часа после сна;
• вторая проводится через 2-3 часа после первой;
• третья порция мокроты сдается пациентом дома, сразу после сна.

Если первые два раза сдача мокроты сдается под контролем медицинского работника, то третья сдается самостоятельно. Необходимо подготовиться к этому процессу, чтобы неправильными действиями не исказить результат.

Для начала, необходимо подготовить стерильную емкость для материала. Она обязательно должна закрываться крышкой. Емкость для мокроты можно приобрести в аптеке либо в лаборатории, где будет происходить исследование. Перед сдачей мокроты необходимо тщательно почистить зубы, чтобы исключить попадание в материал остатков пищи. Важно, чтобы мокрота как можно меньше находилась в ротовой полости и смешивалась со слюной.

Проведение анализов

Для анализа рекомендуется сдавать первую утреннюю мокроту сразу после пробуждения. Материал необходимо доставить в лабораторию в течение 2 часов, избегая воздействия прямых солнечных лучей и высокой температуры. Далее в лаборатории для выявления микобактерии туберкулеза проводят посев мокроты на питательные среды и другие манипуляции. Если выполнять все рекомендации по сбору и сдачи материала, результат будет достоверным.

Также довольно часто исследуют кровь на наличие МБТ. Венозная кровь сдается натощак, с периодом голодания не более 12 часов. Накануне не следует употреблять жирную пищу, это может вызвать трудности с забором материала. Методы исследования, основанные на изучении состава крови, проводятся в поликлинических отделениях или в тубдиспансерах.

Для исследования урины необходимо собрать первую утреннюю мочу. Она наиболее концентрированная и даст более точный результат. Перед этим необходимо провести тщательный туалет наружных половых органов.

Перед проведением пробы Манту необходимо проверить состояние здоровья исследуемого. Врач прослушивает его легкие, осматривает горло и измеряет температуру. Если в момент проведения обследования у пациента наблюдаются острые заболевания, например ОРВИ или ОРЗ, возможен ложноположительный результат обследования.

В некоторых случаях, исследуют ликвор больного, образцы ткани пораженных органов, частицы костной ткани. Процедуры изъятия таких материалов происходит только в специализированном медицинском учреждении.

Расшифровка

Для подтверждения наличия в организме МБТ необходима правильная расшифровка анализов для постановки диагноза туберкулез:

• При окрашивании по Цилю-Нильсону о наличии бактерии будут говорить такие результаты:

  • визуализируются красные либо малиновые палочки на светло-синем либо голубом фоне;
    

    Окрашивание мазка по Цилю-Нильсену

  • практически все палочки ровные, возможно единичные изогнутые бактерии;
  • вкрапления внутри микобактерии более яркого цвета;
  • возможно слегка полосатая окраска, из-за устойчивости к воздействию кислотной среды. Данный результат говорит о заболевании туберкулезом. Учитывая, что зачастую исследуется мокрота, пациенты с положительным результатом могут заражать здоровых людей.

• Серологический метод исследования бывает качественный и количественный. В первом случае, подтверждается или опровергается наличие туберкулезной инфекции. Количественный метод определяет наличие и объем присутствующих иммуноглобулинов в крови, чувствительных к микобактерии. Обнаружение IgM возможно еще в первые дни заболевания и позволяет диагностировать туберкулез.

  Количественный результат подразумевает определение суммы обнаруженных иммунных комплексов. Зачастую, число результата и его расшифровка зависят от лаборатории, в которой проводилось исследования и от самого метода проведения исследования.

• Метод полимеразной цепной реакции является качественным методом выявления Mycobactеrium tuberculоsis. Положительный результат говорит о наличии в организме палочки Коха, что в свою очередь подтверждает туберкулез.
  

  Полимеразная цепная реакция

• Бактериоскопическое исследование материала направлено на обнаружение роста бактерий в питательных средах. Также определяют чувствительность микобактерии к различным антибиотикам. Обязательно изучают мокроту на наличие примесей крови и патологических включений. При туберкулезе будет обнаружено повышенное количество макрофагов и лейкоцитов в мокроте.

  Если есть кровохарканье – будут обнаружены эритроциты. В исследуемом материале могут быть обнаружены фибриновые включения, говорящие об активных очагах поражения, и распавшиеся ткани. Зачастую, результат данного метода исследования только качественный. В редких случаях могут указать количество инфекции.

• Для расшифровки результата туберкулиновой пробы пациенту необходимо явиться на прием к врачу минимум через 48 часов после введения туберкулина. Врач осматривает место введения и измеряет размер папулы. Возможны такие результаты исследования:

  • папула менее 5мм – пациент здоров, контакта с инфекцией не было;
  • папула 10 мм – возможное инфицирование либо контактирование с инфекцией;
  • папула более 15 мм, образование гнойников либо изъязвления в месте введения – большая вероятность туберкулеза. Несмотря на то, что увеличение размера папулы является неблагоприятным знаком, нежелательным является и отсутствие реакции на введение антигена. Это может говорить о сниженном иммунитете. Данный метод диагностики при положительном результате, требует дообследования.
    

    Расшифровка результатов пробы Манту

Сроки диагностики

В зависимости от проводимого метода исследования, сроки получения результатов могут быть самыми разнообразными. Например, анализы ПЦР и серологические исследования проводятся в течение 3-4 часов. Буквально в этот же день пациент может узнать о состоянии своего здоровья и наличии либо отсутствии микобактерии.

Бактериоскопические методы исследования, несмотря на высокую чувствительность, последнее время проводят только параллельно с ПЦР либо ИФА (серологический метод). Это связано с тем, что обнаружение инфекции таким способом – очень длительный процесс. В некоторых случаях необходим ежедневный осмотр материала под микроскопом в течение 10-14 недель. За это время заболевание успевает существенно развиться, что усложняет лечение.

При использовании более новых методов бактериоскопии – культивирование на жидкой питательной среде с автоматическим подсчетом микроорганизмов, результат готов на 10-14 день после начала обследования.

После проведения пробы Манту, пациенту необходимо явиться к врачу для оценки проводимого исследования. Рекомендуется это сделать минимум через 48 часов, но не позднее недели. Наиболее точно оценить реакцию удается через трое суток после введения антигена.

Современная лабораторная диагностика позволяет в кратчайшие сроки и с максимальной точностью выявить присутствие в организме микобактерии туберкулеза. Благодаря этому, возможно начать своевременную терапию, что способствует полному излечению от болезни. Данные методы исследований практически безболезненны и не требуют много времени.